Test katalityczny na bakteriach, aby dowiedzieć się ich zdolność do degradacji nadtlenku wodoru (z rysunkiem)
Test katalazy na bakteriach, aby dowiedzieć się ich zdolność do degradacji nadtlenku wodoru (z rysunkiem)!
Zasada:
Niektóre bakterie mają zdolność degradowania nadtlenku wodoru (H 2 0 2 ) do wody (H 2 O) i tlenu (0, ↑), ponieważ mogą wytworzyć enzym "katalazę".
Podział nadtlenku wodoru przez katalazę jest wskazywany przez pęcherzyki wolnego tlenu gazowego (0, ↑).
W teście na katalazę pętlę badanych bakterii umieszcza się w kropli nadtlenku wodoru pobranej na szkiełko. Jeśli bakteria ma zdolność do wytwarzania katalazy, rozkłada nadtlenek wodoru (H2O2) na wodę i tlen. Wytwarzanie tlenu powoduje bąbelkowanie lub pienienie, co można zauważyć w kropli.
Wymagane materiały:
Slajdy, papier bibuły, pętla do inokulacji, palnik bunsena, komora laminarna, nadtlenek wodoru (3%), izolowane kolonie lub czyste kultury bakterii.
Procedura:
1. Ślizg wyczyścić pod bieżącą wodą (rysunek 7.18).
2. Slajd przeciera się bibulastym papierem i suszy na powietrzu.
3. Kroplę nadtlenku wodoru (3%) należy pobrać pośrodku szkiełka.
4. Pętlę badanych bakterii pobiera się aseptycznie, najlepiej w komorze z przepływem laminarnym, za pomocą sterylizowanej płomieniowo pętli i umieszcza się w kropli nadtlenku wodoru na szkiełku. Pętla jest sterylizowana po każdej inokulacji.
Obserwacje:
1. W kropli pojawia się bąbelkowanie lub pienienie: Katalaza dodatnia.
2. W kropli nie występuje bąbelkowanie ani pienienie: Katalityczne ujemne.
Środki ostrożności:
Kultury bakterii z podłoża agarowego z krwią nie można stosować do testu katalazy, ponieważ krew zawiera katalazę i zawsze daje wynik pozytywny. Katalityczne bakterie ujemne mają tendencję do ginięcia w podłożach bezcukrowych, ponieważ produkują H 2 0 2 lub ponieważ H 2 0 2 gromadzą się w mediach, gdy są wystawione na działanie powietrza i światła.
W związku z tym kultury podstawowe takich bakterii powinny być przechowywane w ciemności i tam, gdzie dostęp do powietrza jest ograniczony. Katalaza znajduje się w prawie wszystkich bakteriach, które mogą rosnąć tlenowo. Ponieważ enzym jest wytwarzany tylko przez zdolne do życia bakterie, kultury w wieku powyżej 24 godzin nie mogą być użyte do testu katalazy.
