Elektroforeza DNA: Przydatne uwagi na temat elektroforezy DNA
Elektroforeza DNA: Przydatne uwagi na temat elektroforezy DNA!
Aby posortować cząsteczki DNA metodą długości, należy zastosować elektroforezę DNA. Kawałki DNA są zawieszone na tacy żelu i poddane działaniu pola elektrycznego, co powoduje migrację do jednego końca tacy. Przy odległości od elektrody odpowiadającej długości pasma DNA oddziela się na pasma. Technika odgrywa rolę w identyfikowaniu genów do diagnozowania choroby i innych form badań genetycznych.
Badane DNA dzieli się na pojedyncze nici. DNA miesza się z barwnikiem lub radioizotopem, który pozwoli na zidentyfikowanie jego miejsca w żelu. Poszczególne nici są następnie oddzielane od siebie za pomocą elektroforezy DNA.
Poprzez wstrzyknięcie materiału genetycznego oddzielającego do dołków rozpoczyna się proces. Są cięte na końcu kawałka żelu. Następnie na płytę żelową nakłada się pole elektryczne. DNA jest przyciągany do elektrody dodatniej ma ujemny ładunek elektryczny.
Żel opiera się DNA, gdy się porusza; mniejsze kawałki mają łatwiejszy czas poruszania się przez pory w żelu, a więc podróżują dalej. Długość odcinka może być bardzo dokładnie określona odległością. Żel poliakrylamidowy stosuje się do oddzielania krótkich fragmentów. W przypadku dłuższych segmentów stosuje się żel agarozowy. Agaroza jest wytwarzana z wodorostów, a poliakryloamid jest polimerem syntetycznym. Żele agarozowe są znacznie mniej gęstymi żelami poliakryloamidowymi i umożliwiają przemieszczanie się większych cząsteczek.
Do bardzo długich odcinków DNA należy zastosować niedawno opracowaną metodę elektroforezy w żelu pulsującym. W tym procesie wykorzystuje się pole elektryczne, które nieustannie podlega subtelnym zmianom kierunku, aby zachować bardzo długie pasma zorientowane poprawnie podczas przechodzenia przez agarozę.
Elektroforeza żelowa może być stosowana do identyfikacji obecności nici DNA o znanej długości. W ten sposób można go wykorzystać do stwierdzenia istnienia pewnych cech lub chorób genetycznych u danej osoby.
Elektroforeza DNA może być również wykorzystana do izolacji nici DNA do rekombinacji jako część projektu inżynierii genetycznej. Podobnie jak w przypadku testów na ojcostwo lub kryminalistyki sądowej, DNA można również wykorzystać do stworzenia genetycznego profilu osoby w celu identyfikacji.
