Błona komórkowa i jej metody izolacji
Membrana plazmowa i jej metody izolacji!
Membrana plazmowa:
Najbardziej zewnętrzna granica komórki składa się z żywych lub nieożywionych materiałów lub obu. Bez względu na ich budowę chemiczną i organizację strukturalną, ich funkcja obejmuje regulację przepływu materiałów do iz komórki oraz zapewnienie pewnego stopnia wsparcia i utrzymania kształtu komórki i wielkości komórki.
Błona plazmatyczna jest różnie nazywana błoną komórkową, lodem plazmowym, błoną komórkową itd. Termin "błona plazmowa" został podany przez Nageli w 1855 roku. Ze względu na trudności techniczne nie jest możliwe badanie struktury błony komórkowej w każdym rodzaju komórki. Większość informacji na ten temat zgromadziła się poprzez badanie ssaczego RBC i osłonki mielinowej włókien nerwowych.
Membrana ta jest tak cienka, że nie można jej rozdzielić za pomocą mikroskopu optycznego, ale w niektórych komórkach jest ona pokryta grubszymi warstwami ochronnymi, które mieszczą się w granicach rozdzielczości mikroskopowej. Na przykład, większość komórek roślinnych ma grubą ścianę celulozy, która pokrywa i chroni prawdziwą błonę plazmatyczną.
Niektóre komórki zwierzęce są otoczone substancjami podobnymi do cementu, które stanowią widoczne ściany komórkowe. Takie warstwy, nazywane również zewnętrznymi powłokami, na ogół nie odgrywają żadnej roli w przepuszczalności, ale mają inne ważne funkcje. W celu zbadania ich struktury, składu chemicznego i poznania fizjologicznego i biochemicznego charakteru błony komórkowej lub innej organolo- gii cytoplazmatycznej, pierwszą rzeczą, z którą mamy do czynienia, jest ich izolacja w stanie czystym.
Metody izolacji:
Ideą izolowanego składnika membranowego jest ten, który nie ma żadnego zanieczyszczenia nie-membranowego. Izolacja membrany może być traktowana jako usunięcie innych składników komórki z komórki. Ta operacja jest nieco mniej trudna w niezarodkowych krwinkach czerwonych ssaków.
Podczas hemolizy struktura membrany ulega poluzowaniu w stopniu wystarczającym, aby umożliwić ucieczkę zawartości komórek bez całkowitego zerwania. Po tym hemolitycznym wydzielanie błony komórkowej erytrocytów jest łatwe. Otrzymany produkt zależy jednak od metody lizy i od pH cieczy.
Druga procedura uzyskiwania błony komórkowej została wprowadzona przez Wolport i О 'Neilla w 1962 roku przez traktowanie Amoeby zbuforowaną; 45% roztwór glicerolu lub 2, 4 M roztwór sacharozy powoduje, że zawartość komórek kurczy się z błony komórkowej, która zachowała swój charakterystyczny Shane. Membrany połączono z zawartością komórek przez delikatną homogenizację, a następnie zebrano masowo przez odwirowanie gęstości.
